導(dǎo)致原子吸收光度計(jì)測(cè)量變量的因素分析
點(diǎn)擊次數(shù):1963 更新時(shí)間:2020-01-17
原子吸收光度計(jì)是應(yīng)用液體的表面張力特性,樣品體積只需要1ul,在偵測(cè)臺(tái)上,經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量,高濃度,免石英管,免毛細(xì)管等耗材偵測(cè)吸收值的優(yōu)點(diǎn)。
原子吸收光度計(jì)可提供200~850nm的全光譜偵測(cè),且不需要暖機(jī),開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array偵測(cè)器,偵測(cè)吸收值可高達(dá)300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可偵測(cè)。
原子吸收光度計(jì)分析中影響測(cè)量條件的可變因素多,在測(cè)量同種樣品的各種測(cè)量條件不同時(shí),對(duì)測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和靈敏度影響很大。選擇合適的工作條件,能有效地消除干擾因素,可得到好的測(cè)量結(jié)果和靈敏度。
1、吸收波長(zhǎng)(分析線)的選擇:通常選用共振吸收線為分析線,測(cè)量高含量元素時(shí),可選用靈敏度較低的非共振線為分析線。如測(cè)Zn時(shí)常選用靈敏的213.9nm波長(zhǎng),但當(dāng)Zn的含量高時(shí),為保證工作曲線的線性范圍,可改用次靈敏線307.5nm波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)量。As,Se等共振吸收線位于200nm以下的遠(yuǎn)紫外區(qū),火焰組分對(duì)其明顯吸收,故用火焰原子吸收法測(cè)定這些元素時(shí),不宜選用共振吸收線為分析線。測(cè)Hg時(shí)由于共振線184.9nm會(huì)被空氣強(qiáng)烈吸收,只能改用此靈敏線253.7nm測(cè)定。
2、光路準(zhǔn)直在分析之前,必須調(diào)整空心陰極燈光的發(fā)射與檢測(cè)器的接受位置,保證提供盡可能大的測(cè)量能量。
3、狹縫寬度的選擇狹縫寬度影響光譜通帶寬度與檢測(cè)器接受的能量。調(diào)節(jié)不同的狹縫寬度,測(cè)定吸光度隨狹縫寬度而變化,當(dāng)有其它譜線或非吸收光進(jìn)入光譜通帶時(shí),吸光度將立即減少。不引起吸光度減少的狹縫寬度,即為應(yīng)選取得適合狹縫寬度。對(duì)于譜線簡(jiǎn)單的元素,如堿金屬、堿土金屬可采用較寬的狹縫以減少燈電流和光電倍增管高壓來(lái)提高信噪比,增加穩(wěn)定性。對(duì)譜線復(fù)雜的元素如鐵、鈷、鎳等,需選擇較小的狹縫,防止非吸收線進(jìn)入檢測(cè)器,來(lái)提高靈敏度,改善標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系。